厌氧微生物高通量筛选和菌库构建
菌落挑取
微生物菌株高通量筛选一般以96孔板或384孔板规格进行。首先将微生物分离源样品系列稀释，均匀涂抹在固体平板培养基上，培养至微生物菌落成熟。将液体培养基分装至96孔板中，每孔100-200uL。将成熟的单一菌落挑取至培养液培中，培养至菌液浑浊。人工挑取可使用牙签或移液器枪头，也可由全自动菌落挑取仪完成。根据项目和实验需要，可将96孔板中的液培菌液中平行复制到新板或96孔规格的有盖冷藏管，加甘油至终浓度10-20%，-80C保存。剩余菌液可用于下游的高通量功能性筛选或16S测序等。
分离好氧微生物时，所有操作可在一般实验室的有氧环境中进行。
如果分离目标为兼性厌氧菌，可在有氧环境中挑取菌落，然后在厌氧条件下培养。
分离严格厌氧微生物时，固体平板培养微生物、液体培养基移液分装、菌落挑取转接等步骤必须在厌氧手套箱中进行。
高通量操作演示
视频展示的是一款高通量微生物菌落全自动挑取仪。挑取仪上方有一个摄像头，可识别生长成熟的单一菌落，也可进行人工修正确定是否挑取。工作部包含96根钢针，按96孔板规格排列。菌落挑取前，钢针依次用漂白剂消毒，用水漂洗，用酒精消毒，最后加热烘干。计算机程序控制钢针提取菌落的位置。每次只有一根针挑取一个菌落，96根针全部完成挑取后，工作部将96个针头全部浸没到96孔板的液体培养基中完成菌落到液培的转接。转接完成后，钢针依次用漂白剂消毒，用水漂洗，用酒精消毒，最后加热烘干后再进行第二板的菌落挑取。自动挑取仪挑取速度极快，一个小时可以完成10板，差不多是一个人一天的手工挑取的工作进度。
视频展示的是一款高通量冷冻管全自动开盖仪，96孔板规格，非常适合高通量模式下的微生物液培超低温冷冻保存。冷冻管的盖子非常密闭，适合严格厌氧微生物的长期保存。整机体积很小，可放置于厌氧手套箱中，作为厌氧微生物高通量筛选平台的一部分。
厌氧样品/菌种保藏管
适用于厌氧微生物菌种超低温保存。每盒共96管，8X12规格排列，每管底部均有二维码，可用于扫描仪示踪。适合高通量全自动样品转接和厌氧菌库复制。可购置配套的8通道电动开盖器或全自动开盖仪进行高通量操作。盖子可单独购买，重复灭菌。
Thermo Fisher Matrix ScrewTop Tubes，0.2mL、0.5mL、1mL不同体积。
厌氧微生物高通量菌库
敬请联系
韩如旸 ruyanghan@microreme.com | 微信 RuyangMustang
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韩如旸，厌氧微生物高通量筛选和菌库构建. 2020. 网址：ruyangmicrobio.org/anaerobic-high-throughput.